我們在發光試劑開發過(guo)程中，很大(da)一部分就(jiu)是(shi)為了試劑的靈(ling)敏度(du)而煩惱，還(huan)有就(jiu)是(shi)試劑的穩定(ding)性(xing)，兩座大(da)山壓的你喘不過(guo)氣 ，今天(tian)就(jiu)和大(da)家一起(qi)鏟平(ping)一座山，剩下的另一坐山我們后(hou)面在探討(tao)，如有不對地方(fang)還(huan)請各位多(duo)多(duo)指(zhi)教，同時也可(ke)以在留(liu)言處交流，相互學習進步!

化(hua)學發光試劑的(de)靈敏(min)度(du)直接影響到檢(jian)測(ce)結果的(de)準確性。如果試劑的(de)靈敏(min)度(du)不夠，可(ke)能會導致生臨床樣本的(de)漏檢(jian)或(huo)者誤判，從而(er)延誤疾病的(de)治(zhi)療(liao)或(huo)者造(zao)成不必要(yao)的(de)醫療(liao)干預。如何提高試劑靈敏(min)度(du)，接下來我從這幾個方面進(jin)行歸納(na)總(zong)結。

1.優化反應條件

一）溫度控制

這個(ge)原因大(da)家都知道，但是也容(rong)易(yi)忽(hu)略(lve)，試劑反(fan)(fan)應(ying)的(de)(de)速率和(he)效率往往與溫度(du)(du)密切(qie)相關，在較(jiao)低(di)溫度(du)(du)下，分(fen)子的(de)(de)運動(dong)相對緩慢，反(fan)(fan)應(ying)的(de)(de)活性(xing)較(jiao)低(di)，化學發(fa)光(guang)試劑的(de)(de)發(fa)光(guang)強度(du)(du)可能(neng)很(hen)微弱。隨著溫度(du)(du)的(de)(de)升(sheng)高(gao)，分(fen)子開(kai)始活躍(yue)起(qi)來，它們(men)之間的(de)(de)碰撞頻率增(zeng)加(jia)，反(fan)(fan)應(ying)逐漸加(jia)速，發(fa)光(guang)強度(du)(du)也開(kai)始增(zeng)強。然而，如果溫度(du)(du)過(guo)高(gao)，就像過(guo)度(du)(du)熱情的(de)(de)參(can)與者容(rong)易(yi)失控(kong)一樣，反(fan)(fan)應(ying)可能(neng)會(hui)偏離(li)正常的(de)(de)軌道，出(chu)現一些副反(fan)(fan)應(ying)或者導致(zhi)發(fa)光(guang)試劑的(de)(de)分(fen)解，從而降低(di)發(fa)光(guang)效率。

二）pH調節

pH值的大小直接影響著反(fan)應(ying)體系中各種離子(zi)的存在(zai)形(xing)式和活性(xing)(xing)，進(jin)而(er)影響化(hua)(hua)(hua)學發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)反(fan)應(ying)的進(jin)程。你對(dui)一種化(hua)(hua)(hua)學發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)試劑進(jin)行pH值優(you)化(hua)(hua)(hua)時，是(shi)不是(shi)需要先對(dui)該(gai)試劑原(yuan)料的化(hua)(hua)(hua)學結(jie)構和反(fan)應(ying)機制有(you)深(shen)入的了解。例如(ru)，某些試劑可能(neng)在(zai)酸性(xing)(xing)環境下，其關鍵官(guan)能(neng)團會被質子(zi)化(hua)(hua)(hua)，從(cong)而(er)改變其反(fan)應(ying)活性(xing)(xing)，影響與其他反(fan)應(ying)物的結(jie)合能(neng)力，導致發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)強度降低。而(er)在(zai)堿性(xing)(xing)環境中，可能(neng)會發(fa)(fa)(fa)生其他不利于發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)反(fan)應(ying)的變化(hua)(hua)(hua)，如(ru)某些離子(zi)的沉淀(dian)或者反(fan)應(ying)物的分解。 

三）緩沖液選擇

我(wo)們知道(dao)，化(hua)(hua)學(xue)反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)是一個動(dong)態(tai)的(de)(de)(de)(de)(de)過程，在這個過程中(zhong)(zhong)，會(hui)產生或者(zhe)消耗(hao)各種離(li)(li)子(zi)，這些(xie)離(li)(li)子(zi)濃度的(de)(de)(de)(de)(de)變化(hua)(hua)可(ke)能(neng)會(hui)影響反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)平(ping)衡和(he)速率。而(er)緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(ye)(ye)能(neng)夠(gou)通(tong)過自(zi)身(shen)的(de)(de)(de)(de)(de)緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)機制，調節離(li)(li)子(zi)濃度的(de)(de)(de)(de)(de)波(bo)動(dong)。例如，當(dang)反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)產生酸性(xing)(xing)物(wu)(wu)質時，緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(ye)(ye)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)堿(jian)性(xing)(xing)成(cheng)分(fen)會(hui)與之(zhi)反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)，中(zhong)(zhong)和(he)酸性(xing)(xing)，防止pH值的(de)(de)(de)(de)(de)急劇下降；反(fan)(fan)(fan)之(zhi)，當(dang)反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)產生堿(jian)性(xing)(xing)物(wu)(wu)質時，緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(ye)(ye)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)酸性(xing)(xing)成(cheng)分(fen)會(hui)發揮作用(yong)。選擇合適的(de)(de)(de)(de)(de)緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(ye)(ye)并非易事，你(ni)需要(yao)(yao)考慮多個因素。首(shou)先(xian)是緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(ye)(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)范圍，它必須覆蓋化(hua)(hua)學(xue)發光反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)所需要(yao)(yao)的(de)(de)(de)(de)(de)pH值范圍。其次是緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(ye)(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)成(cheng)分(fen)不(bu)能(neng)與化(hua)(hua)學(xue)發光試(shi)劑或者(zhe)其他反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)物(wu)(wu)發生化(hua)(hua)學(xue)反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)，否則(ze)會(hui)干擾反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)正常進行。此外，緩(huan)(huan)(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(ye)(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)離(li)(li)子(zi)強(qiang)度也需要(yao)(yao)合適，過高的(de)(de)(de)(de)(de)離(li)(li)子(zi)強(qiang)度可(ke)能(neng)會(hui)影響反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)物(wu)(wu)之(zhi)間的(de)(de)(de)(de)(de)相(xiang)互作用(yong)，而(er)過低的(de)(de)(de)(de)(de)離(li)(li)子(zi)強(qiang)度可(ke)能(neng)無法有效地穩定反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)環境。

2.改進發光底物

一）選擇高效底物

不同的發光底物就像不同性能的演員，它們的發光效率有著顯著的差異。選擇具有更高發光效率的底物就像是挑選一位更出色的演員，能夠顯著提高整個檢測的靈敏度。以魯米諾（Luminol）為例，它是化學發光檢測領域的一位老牌“演員”，長期以來被廣泛應用。魯米諾具有一定的發光特性，在許多檢測中發揮著重要作用。然而，隨著科學技術的不斷發展，一些新型底物如過氧化氫酶（Hrp）底物開始嶄露頭角。這些新型底物就像是具有獨特技能的新演員，它們在發光效率方面展現出了卓越的性能。與魯米諾相比，它們可能具有更合理的化學結構，能夠在與其他反應物的相互作用中更高效地產生發光現象。例如，過氧化氫酶（Hrp）底物在特定的反應體系中，可能能夠更快速地與酶結合并轉化為發光狀態，而且發光的強度和持續時間都可能優于魯米諾。在這里建議小白在尋找更高效的發光底物時，需要對各種底物的化學結構、反應機制以及在不同體系中的性能進行深入的研究和比較。他們會在相同的反應條件下，分別測試不同底物的發光效率，觀察發光強度、發光起始時間、發光持續時間等多個指標，從而篩選出最適合特定檢測需求的高效底物。 

二）底物濃度優化

適(shi)當增加底物(wu)濃度(du)，就像(xiang)是給(gei)反應(ying)注入了更多(duo)的“燃料”，在一(yi)定范圍內能夠提高(gao)(gao)發光強度(du)。然而，這(zhe)就像(xiang)烹飪一(yi)樣，食(shi)材（底物(wu)）的量(liang)并不是越多(duo)越好(hao)。過(guo)高(gao)(gao)的底物(wu)濃度(du)可(ke)能會引發一(yi)種(zhong)類(lei)似于“過(guo)度(du)烹飪”的現(xian)象——淬(cui)滅效應(ying)。 

 當我(wo)開始探索底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)對化(hua)學發(fa)光(guang)(guang)(guang)反(fan)應的(de)(de)(de)(de)(de)影響時，我(wo)會(hui)從較低(di)的(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)開始進(jin)行實(shi)驗。在低(di)濃(nong)(nong)度(du)下(xia)(xia)，隨著底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)的(de)(de)(de)(de)(de)增加，反(fan)應體系(xi)中能夠(gou)參與(yu)發(fa)光(guang)(guang)(guang)反(fan)應的(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)分子數量增多(duo)，發(fa)光(guang)(guang)(guang)強(qiang)度(du)會(hui)逐漸增強(qiang)。這(zhe)是因為(wei)更多(duo)的(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)分子有機會(hui)與(yu)其他反(fan)應物(wu)(wu)(wu)發(fa)生反(fan)應，產生更多(duo)的(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)光(guang)(guang)(guang)產物(wu)(wu)(wu)。但是，當底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)達到(dao)一(yi)定程度(du)后，情況就會(hui)發(fa)生變化(hua)。過(guo)高的(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)可(ke)能會(hui)導致底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)分子之(zhi)間的(de)(de)(de)(de)(de)相互(hu)作(zuo)用過(guo)于復(fu)雜，它們可(ke)能會(hui)相互(hu)干擾(rao)，或者與(yu)其他反(fan)應物(wu)(wu)(wu)形(xing)成不(bu)(bu)利于發(fa)光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)(de)(de)(de)復(fu)合物(wu)(wu)(wu)。這(zhe)種淬(cui)滅效(xiao)應會(hui)使得發(fa)光(guang)(guang)(guang)強(qiang)度(du)不(bu)(bu)再隨著底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)的(de)(de)(de)(de)(de)增加而增強(qiang)，反(fan)而可(ke)能會(hui)下(xia)(xia)降。所以，小白們需要(yao)通過(guo)精心設計實(shi)驗來(lai)確定最佳底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)。我(wo)會(hui)在一(yi)個(ge)較大的(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)范圍內，設置多(duo)個(ge)不(bu)(bu)同的(de)(de)(de)(de)(de)濃(nong)(nong)度(du)點，進(jin)行反(fan)應測(ce)試，繪制出發(fa)光(guang)(guang)(guang)強(qiang)度(du)與(yu)底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)之(zhi)間的(de)(de)(de)(de)(de)關系(xi)曲線。通過(guo)對這(zhe)個(ge)曲線的(de)(de)(de)(de)(de)分析，能夠(gou)準確地找到(dao)那個(ge)既能保證(zheng)足夠(gou)的(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)光(guang)(guang)(guang)強(qiang)度(du)，又(you)不(bu)(bu)會(hui)引發(fa)淬(cui)滅效(xiao)應的(de)(de)(de)(de)(de)最佳底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)度(du)。 

3.增強信號放大

一）酶促放大

酶，這種生(sheng)物催(cui)化劑(ji)，具有獨(du)特的能(neng)力，能(neng)夠在反應中顯著地放大(da)信號。例如，辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷(lin)酸酶（AP）就像是兩位得力的“信號增強助(zhu)手(shou)”，經常被用于(yu)化學發光試劑(ji)中。  

以辣根過(guo)(guo)氧(yang)化(hua)(hua)物(wu)(wu)(wu)酶(mei)（HRP）為(wei)例，它在特(te)定(ding)的(de)(de)(de)(de)化(hua)(hua)學發(fa)(fa)(fa)(fa)光(guang)反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)體系中，能(neng)夠(gou)催化(hua)(hua)底(di)物(wu)(wu)(wu)發(fa)(fa)(fa)(fa)生(sheng)一(yi)系列(lie)的(de)(de)(de)(de)化(hua)(hua)學反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)。這個(ge)過(guo)(guo)程(cheng)就像是(shi)一(yi)個(ge)連鎖反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)，酶(mei)首先與(yu)(yu)底(di)物(wu)(wu)(wu)結(jie)合，然后通過(guo)(guo)自身的(de)(de)(de)(de)催化(hua)(hua)活性，將(jiang)底(di)物(wu)(wu)(wu)轉化(hua)(hua)為(wei)一(yi)種具有(you)更高反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)活性的(de)(de)(de)(de)中間(jian)產(chan)物(wu)(wu)(wu)。這種中間(jian)產(chan)物(wu)(wu)(wu)又能(neng)夠(gou)進一(yi)步與(yu)(yu)其他反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)物(wu)(wu)(wu)反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)，生(sheng)成(cheng)更多(duo)的(de)(de)(de)(de)發(fa)(fa)(fa)(fa)光(guang)產(chan)物(wu)(wu)(wu)。每一(yi)個(ge)被酶(mei)催化(hua)(hua)的(de)(de)(de)(de)底(di)物(wu)(wu)(wu)分子(zi)都像是(shi)一(yi)顆種子(zi)，能(neng)夠(gou)引(yin)發(fa)(fa)(fa)(fa)一(yi)系列(lie)的(de)(de)(de)(de)反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)，最終產(chan)生(sheng)大(da)量(liang)的(de)(de)(de)(de)發(fa)(fa)(fa)(fa)光(guang)產(chan)物(wu)(wu)(wu)，從(cong)而顯(xian)著放(fang)(fang)大(da)了信(xin)(xin)(xin)號。堿性磷酸酶(mei)（AP）也有(you)著類似的(de)(de)(de)(de)功能(neng)。小白在利用(yong)酶(mei)促放(fang)(fang)大(da)信(xin)(xin)(xin)號時，需要(yao)(yao)對酶(mei)的(de)(de)(de)(de)特(te)性有(you)深(shen)入的(de)(de)(de)(de)了解，你(ni)要(yao)(yao)知道酶(mei)的(de)(de)(de)(de)最適反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)條件，如(ru)溫度、pH值等，以確保酶(mei)能(neng)夠(gou)發(fa)(fa)(fa)(fa)揮(hui)出最佳的(de)(de)(de)(de)催化(hua)(hua)活性。同時，你(ni)還需要(yao)(yao)精確控制酶(mei)的(de)(de)(de)(de)用(yong)量(liang)，因為(wei)酶(mei)的(de)(de)(de)(de)用(yong)量(liang)過(guo)(guo)少可(ke)能(neng)無法達到有(you)效(xiao)的(de)(de)(de)(de)信(xin)(xin)(xin)號放(fang)(fang)大(da)效(xiao)果(guo)，而酶(mei)的(de)(de)(de)(de)用(yong)量(liang)過(guo)(guo)多(duo)可(ke)能(neng)會導(dao)致(zhi)不(bu)必要(yao)(yao)的(de)(de)(de)(de)成(cheng)本增加(jia)，甚至可(ke)能(neng)會引(yin)發(fa)(fa)(fa)(fa)一(yi)些副反(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)。 

二）納米材料

這個有點遠！量子點是一種納米級別的半導體材料，它具有尺寸小、量子產率高、熒光發射光譜窄等優點。量子點會吸附在某些反應物的表面，改變它們的電子結構或者反應活性，從而促進發光反應的進行。而且，量子點自身的光學性質使得它能夠吸收和重新發射光子，這一過程可以有效地增強發光信號。金納米顆粒也有著獨特的作用。金納米顆粒具有良好的生物相容性和表面等離子體共振效應。當金納米顆粒存在于化學發光反應體系中時，它可以通過表面等離子體共振效應增強局部的電磁場，從而提高發光試劑的激發效率，使得發光強度增加。小白你在將納米材料應用于化學發光檢測時，你需要注意的是，如何確保納米材料在反應體系中的均勻分散，避免團聚現象的發生，因為團聚可能會影響納米材料的性能。同時，他們還需要研究納米材料與其他反應物之間的相互作用機制，以便更好地發揮納米材料的信號放大作用。 

三）生物素 - 親和素系統

在(zai)這(zhe)(zhe)個(ge)(ge)(ge)系(xi)統(tong)中，生(sheng)物(wu)(wu)素(su)可(ke)(ke)以(yi)(yi)與各(ge)種生(sheng)物(wu)(wu)分(fen)子(zi)，如(ru)抗體、酶等(deng)進行共(gong)價結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)。而親(qin)和(he)(he)素(su)具(ju)有四個(ge)(ge)(ge)相同的(de)(de)(de)亞(ya)基，每個(ge)(ge)(ge)亞(ya)基都能夠與生(sheng)物(wu)(wu)素(su)特異(yi)性結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)。這(zhe)(zhe)就(jiu)意味著(zhu)一(yi)個(ge)(ge)(ge)親(qin)和(he)(he)素(su)分(fen)子(zi)可(ke)(ke)以(yi)(yi)同時結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)四個(ge)(ge)(ge)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)分(fen)子(zi)。當將這(zhe)(zhe)個(ge)(ge)(ge)系(xi)統(tong)應(ying)用(yong)于化學發光(guang)檢(jian)測時，可(ke)(ke)以(yi)(yi)通過(guo)巧妙的(de)(de)(de)設計來實現(xian)信(xin)號(hao)放(fang)大(da)(da)。例(li)如(ru)，你(ni)可(ke)(ke)以(yi)(yi)先將生(sheng)物(wu)(wu)素(su)標(biao)記在(zai)化學發光(guang)試劑或(huo)者檢(jian)測探針上，然后加(jia)入(ru)親(qin)和(he)(he)素(su)。由于親(qin)和(he)(he)素(su)與生(sheng)物(wu)(wu)素(su)的(de)(de)(de)高親(qin)和(he)(he)力，它們(men)會(hui)迅速結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)。接著(zhu)，可(ke)(ke)以(yi)(yi)再加(jia)入(ru)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)標(biao)記的(de)(de)(de)信(xin)號(hao)放(fang)大(da)(da)分(fen)子(zi)，如(ru)酶或(huo)者納米材料等(deng)。這(zhe)(zhe)些生(sheng)物(wu)(wu)素(su)標(biao)記的(de)(de)(de)信(xin)號(hao)放(fang)大(da)(da)分(fen)子(zi)又(you)可(ke)(ke)以(yi)(yi)與親(qin)和(he)(he)素(su)上未結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)的(de)(de)(de)亞(ya)基結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)。這(zhe)(zhe)樣，通過(guo)一(yi)級又(you)一(yi)級的(de)(de)(de)結(jie)(jie)合(he)(he)(he)(he)，就(jiu)能夠將信(xin)號(hao)不斷放(fang)大(da)(da)。小白你(ni)在(zai)利用(yong)生(sheng)物(wu)(wu)素(su) - 親(qin)和(he)(he)素(su)系(xi)統(tong)時，需要精確控制(zhi)各(ge)個(ge)(ge)(ge)組(zu)分(fen)的(de)(de)(de)濃度(du)(du)和(he)(he)加(jia)入(ru)順序。如(ru)果(guo)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)或(huo)者親(qin)和(he)(he)素(su)的(de)(de)(de)濃度(du)(du)過(guo)高或(huo)過(guo)低，都可(ke)(ke)能會(hui)影響(xiang)信(xin)號(hao)放(fang)大(da)(da)的(de)(de)(de)效果(guo)。而且，加(jia)入(ru)順序錯誤可(ke)(ke)能會(hui)導致(zhi)反應(ying)無法按照預期進行，無法實現(xian)有效的(de)(de)(de)信(xin)號(hao)放(fang)大(da)(da)。 

4.減少背景信號

一）去除干擾物質

樣品中的(de)(de)(de)蛋(dan)白質(zhi)、脂質(zhi)等物(wu)(wu)質(zhi)就是(shi)常(chang)見的(de)(de)(de)干擾物(wu)(wu)質(zhi)，它們可(ke)能會(hui)與化學發(fa)光(guang)(guang)試劑或者其(qi)他(ta)反(fan)應(ying)物(wu)(wu)發(fa)生非(fei)特(te)異性結合(he)，從而產生額外(wai)的(de)(de)(de)發(fa)光(guang)(guang)信號或者干擾正常(chang)的(de)(de)(de)發(fa)光(guang)(guang)信號。因此，通(tong)過(guo)預(yu)處理樣品，去除(chu)這(zhe)些可(ke)能干擾發(fa)光(guang)(guang)信號的(de)(de)(de)物(wu)(wu)質(zhi)就顯得尤為(wei)重要。對(dui)于蛋(dan)白質(zhi)的(de)(de)(de)去除(chu)，可(ke)以采用多(duo)種(zhong)方法(fa)(fa)。例如，鹽析法(fa)(fa)是(shi)一種(zhong)常(chang)用的(de)(de)(de)方法(fa)(fa)。通(tong)過(guo)向樣品中加入適(shi)量(liang)的(de)(de)(de)鹽，如硫酸銨，蛋(dan)白質(zhi)的(de)(de)(de)溶(rong)解度會(hui)降低，從而沉(chen)淀(dian)出來(lai)。這(zhe)種(zhong)方法(fa)(fa)相對(dui)簡單易行，但可(ke)能會(hui)對(dui)樣品中的(de)(de)(de)其(qi)他(ta)成分產生一定的(de)(de)(de)影響。。 

二）特異性原料

在化學發光檢測中，使用特(te)異(yi)性(xing)更(geng)強(qiang)的抗(kang)體(ti)或(huo)探針(zhen)(zhen)就像是(shi)(shi)派出精準的偵察兵，能(neng)(neng)夠減少非特(te)異(yi)性(xing)結(jie)合，從而(er)降低背景信號。特(te)異(yi)性(xing)是(shi)(shi)衡(heng)量(liang)(liang)抗(kang)體(ti)或(huo)探針(zhen)(zhen)性(xing)能(neng)(neng)的一(yi)個重(zhong)要指(zhi)標(biao)(biao)。當檢測目(mu)標(biao)(biao)是(shi)(shi)一(yi)種(zhong)特(te)定的生(sheng)物(wu)(wu)標(biao)(biao)志(zhi)物(wu)(wu)時，特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)能(neng)(neng)夠精準地識(shi)(shi)別并結(jie)合目(mu)標(biao)(biao)生(sheng)物(wu)(wu)標(biao)(biao)志(zhi)物(wu)(wu)，而(er)盡量(liang)(liang)避免與其(qi)他(ta)非目(mu)標(biao)(biao)物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)結(jie)合。例如，在檢測某種(zhong)疾病相關的蛋(dan)白質(zhi)(zhi)標(biao)(biao)志(zhi)物(wu)(wu)時，一(yi)種(zhong)高特(te)異(yi)性(xing)的抗(kang)體(ti)能(neng)(neng)夠準確地識(shi)(shi)別這種(zhong)蛋(dan)白質(zhi)(zhi)的特(te)定結(jie)構域，而(er)不會(hui)與樣品中其(qi)他(ta)類(lei)似結(jie)構的蛋(dan)白質(zhi)(zhi)發生(sheng)交叉反應。

三）優化洗滌步驟

在(zai)化(hua)學發(fa)(fa)光檢(jian)測過(guo)(guo)程中，洗(xi)滌(di)步驟(zou)就像是一(yi)場細致(zhi)的(de)(de)大(da)掃除，通(tong)過(guo)(guo)多(duo)(duo)次(ci)洗(xi)滌(di)去除未(wei)(wei)結(jie)(jie)(jie)合(he)的(de)(de)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)，減少背景信號。在(zai)進行化(hua)學發(fa)(fa)光檢(jian)測時，通(tong)常會(hui)(hui)使(shi)(shi)用(yong)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)來標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)檢(jian)測試劑或(huo)者(zhe)目標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)分子(zi)。然而(er)(er)，在(zai)反應結(jie)(jie)(jie)束后，可(ke)(ke)能(neng)會(hui)(hui)有(you)(you)一(yi)些未(wei)(wei)結(jie)(jie)(jie)合(he)的(de)(de)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)殘(can)留在(zai)體系中，這些未(wei)(wei)結(jie)(jie)(jie)合(he)的(de)(de)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)可(ke)(ke)能(neng)會(hui)(hui)產生額(e)外的(de)(de)發(fa)(fa)光信號，從(cong)而(er)(er)增加(jia)背景信號。因此，需(xu)要通(tong)過(guo)(guo)洗(xi)滌(di)步驟(zou)將它們去除。洗(xi)滌(di)過(guo)(guo)程需(xu)要注意多(duo)(duo)個方面。首先是洗(xi)滌(di)液的(de)(de)選擇，洗(xi)滌(di)液需(xu)要能(neng)夠有(you)(you)效地溶解(jie)未(wei)(wei)結(jie)(jie)(jie)合(he)的(de)(de)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)，同時又不會(hui)(hui)對已經(jing)結(jie)(jie)(jie)合(he)的(de)(de)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)或(huo)者(zhe)目標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)分子(zi)產生影響(xiang)。例如，可(ke)(ke)以使(shi)(shi)用(yong)含有(you)(you)一(yi)定(ding)濃度的(de)(de)緩沖鹽和表面活性劑的(de)(de)洗(xi)滌(di)液。其次(ci)是洗(xi)滌(di)的(de)(de)次(ci)數(shu)和時間(jian)，洗(xi)滌(di)次(ci)數(shu)過(guo)(guo)少或(huo)者(zhe)時間(jian)過(guo)(guo)短可(ke)(ke)能(neng)無法徹底去除未(wei)(wei)結(jie)(jie)(jie)合(he)的(de)(de)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)，而(er)(er)洗(xi)滌(di)次(ci)數(shu)過(guo)(guo)多(duo)(duo)或(huo)者(zhe)時間(jian)過(guo)(guo)長可(ke)(ke)能(neng)會(hui)(hui)導(dao)致(zhi)已經(jing)結(jie)(jie)(jie)合(he)的(de)(de)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)物(wu)脫(tuo)落(luo)。